干扰烟草GA 20-氧化酶siRNA植物表达载体的构建及矮化烟草的产生
稿件作者：谈心
通讯作者：马欣荣
刊物名称：应用与环境生物学报
发表年份：2008
卷：14
期：1
页码：048-052
影响因子：
文章摘要：
根据烟草（Nicatiana tabacum）GA 20-氧化酶基因序列，设计2对分别含有特定酶切位点的特异引物，以烟草基因组DNA为模板，扩增目的基因（约250bp）片段，将正、反向目的片段分别插入中间载体的内含子两侧，再经BamH I和Sac I双酶切回收约700bp的目的片段，插入到双元载体质粒p2355中，成功构建了含GA 20-氧化酶基因片段的反向重复序列植物表达载体p23700，其转录产物能形成发夹RNA(hpRNA)，产生小分子干扰RNA，干扰目的基因的表达，将p23700质粒导入人根癌农杆菌EHA105中并转化烟草叶片细胞，经选择分化培养，获得表型矮化的转基因烟草，图4参14
