黑麦草花叶病毒（RgMV）严重危害黑麦草生长及产量。根据GeneBank提供的黑麦草花叶病毒HC-pro基因序列，合成HC-pro基因中404bp左右的片段HCp。设计2对含有特定酶切位点的特异引物，以HCp作为模板扩增，将正、反向的目的片段分别插入中间载体pSK-int的内含子两侧，再经过BamH I和Sac I双酶切回收约1000bp的目的片段，插入到双元载体质粒p2355中，成功构建了含黑麦草花叶病毒HC-pro基因的反向重复序列植物表达载体p23iHCp，并导入根癌农杆菌中转化多年生黑麦草。其转录产物形成发夹RNA(hpRNA)，产生小分子干扰RNA，干扰目的基因的表达，以期提高转基因多年生黑麦草对RgMV的抗性。